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牡蛎是我国出口量较大的水产品之一,由于产品本身的特殊性,在生长过程中易产生腹泻性贝毒(DSP).本实验中原料牡蛎DSP生物法检测结果为阴性,冷冻贮存4个月后检测结果即为阳性.本研究以分析这一变化原因为目的,采用LC-MS法对DSP生物检测的阳性样品进行确认,结果表明,生物法DSP检测的结果为假阳性,造成生物法DSP检测中小白鼠死亡的是牡蛎在贮藏过程中产生的脂溶性有毒物质.进一步分析确定该有毒物质为牡蛎脂肪水解物--游离脂肪酸.同时本研究对牡蛎在不同贮存温度和贮存时间下产生的游离脂肪酸含量进行了测定,在-10 ℃贮存温度下,贮存0,2,4,6,8,10个月,游离脂肪酸的变化范围为5.2~788.6 mg/kg;在-10 ℃,-18 ℃,-25 ℃贮存温度下,贮存4个月,游离脂肪酸的变化范围为92.5~389 mg/kg. 相似文献
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Expression of the Phycoerythrin Gene of Gracilaria lemaneiformis (Rhodophyta) in E. coli and Evaluation of the Bioactivity of Recombinant PE 总被引:1,自引:0,他引:1
WEN Ruobing) SUI Zhenghong) * ZHANG Xuecheng) ZHANG Shuang) and QIN Song) ) Laboratory of Marine Genetics Breeding College of Marine Life Sciences Ocean University of China Qingdao P. R. China ) Institute of Oceanology Chinese Academy of Sciences Qingdao P.R. China 《中国海洋大学学报(英文版)》2007,6(4):373-377
Phycoerythrin (PE) is one of the most important proteins involved in light capturing during photosynthesis in red algae. Its potential biological activities had gained wide concerns. In the present study, tumor cytotoxic and hydroxyl radical assay were preformed to detect the bioactivity of recombinant PE. Recombinant plasmids pGEX-PE and pBGL were transformed into E.coli BL21 to make two recombinant strains BEX (pGEX-PE) and BGL (pBGL). PE expressing in BEX (pGEX-PE) was validated by SDS-PAGE and Western blotting analysis. SDS-PAGE analysis indicated that the PE-GST fusion protein was mostly inclusion bod- ies. Specific expression of PE was confirmed by Western blotting analysis. The recombinant E. coli BEX (pGEX-PE) cells were col- lected and sonicated. The supernatants were reserved for the tumor cytotoxic experiments. The result of tumor cytotoxic assay indi- cated that the supernatants containing PE had the activity of inhibiting the growth of Hela cells and with the increase of protein con- centration, the inhibiting rate increased from 37.31% to 63.26%, which showed significant difference from the control. Hydroxyl radical scavenging effect was tested with supernatants of BEX (pGEX-PE) and BGL (pBGL) cell lysates treated with sonication and heating. For the sonication samples, the scavenging rates of the supernatants of BEX (pGEX-PE) and BGL (pBGL) cell lysates were significantly higher than the negative control BL21(pGEX-4T) (P<0.02), and the scavenging rates increased slowly following the increase of the protein content. For the heating samples, except for the 0.2 mg mL-1 BGL (pBGL) products, the scavenging effects of the supernatants of BEX (pGEX-PE) and BGL (pBGL) cell lysates were stronger than that of negative control BL21(pGEX-4T). However, the effect intensity was not positively correlated with the increase of the protein concentration. Though a partially de- creased hydroxyl radical scavenging activity was led by heating, the biological activity was still retained and conspicuous. This re- search showed that phycoerythrin protein expressing in E. coli has the potential medical and sanitarian value. 相似文献
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为探索和建立免疫学结合荧光技术对赤潮生物的定性、定量检测,制备了3种粒径不同的赤潮藻——赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)、共生甲藻(Symbiodinium sp)、链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)的多克隆抗体,并采用封闭吸附处理以提高抗体的特异性;采用间接酶联免疫法检测了抗体的效价;结果表明未经吸附处理的赤潮异弯藻、共生甲藻的效价分别为1:41 000,1:18 000以上,显示是高亲合力的抗体;链状亚历山大藻抗体的效价达到1:3 500,相比另两种藻的效价较低;吸附处理后的3种多克隆抗体的特异性明显提高,而效价有所下降。3种多克隆抗体与各自藻细胞均有很强的结合力,赤潮异弯藻和共生甲藻的荧光信号均匀分布于细胞表面,链状亚历山大藻细胞的荧光信号在细胞表面分布不均匀,主要集中在腹部横沟内。制备的多克隆抗体只与自身藻细胞结合,与另外2种藻细胞无交叉反应。链状亚历山大藻抗体只与自身藻细胞结合,与塔马亚历山大藻无交叉反应,可作为同属内不同种的鉴别。结合了免疫学和荧光技术,具有特异、灵敏、直观和简便的优点,并且费用低,对于开拓赤潮准确定性、定量检测方法和技术具有重要价值。 相似文献
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目的:基于网络药理学研究香附治疗女性青春期后痤疮的作用机制。方法:通过TCMSP数据库获取香附的活性成分与相应靶点,采用GeneCard数据库获得与痤疮相关的疾病靶点,使用STRING数据库和Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,应用Bioconductor数据库进行基因本体(GO)功能、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:香附的有效活性成分共18种,痤疮相关靶点570个,潜在靶点21个,药物-疾病靶点21个。PPI 网络显示,白细胞介素-6、血管内皮生长因子A、白三醇过氧化物酶体增殖物激活受体γ、表皮生长因子受体、白三烯醇雌激素受体的连接程度最高。GO功能富集分析结果显示,交集基因主要参与了整合素结合、核受体活性、配体激活转录因子活性、ATP酶结合等。KEGG通路主要涉及脂质与动脉粥样硬化、流体剪切应力与动脉粥样硬化、肿瘤坏死因子信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路等。结论:香附可通过调节多种生物学功能和各项通路治疗女性青春期后痤疮,为临床运用香附治疗女性青春期后痤疮提供了理论支持。 相似文献